下面从原理方面简要介绍几种常用的组织化学染色技术:1、显示琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的硝基-BT法:(Succinatedehydrogenase)⑴酶的定位及生物学意义:琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶,其存在于所有有氧呼吸的细胞,和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白(FP,Flavoprotein)为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。⑵原理:上述的反应后一步的原理是,硝基-BT(Nitro-bluetetrozolyum,四唑氮蓝)系异环族化合物四唑盐,当它接受氢时,本身被还原为有色沉淀产物(甲)(Formazan)。透明①二甲苯的容积应为组织块总体积的5-10倍以上。②组织块在二甲苯中透明的时间,应根据组织的种类和组织块的大小及液体的新鲜程度适当进行调整,如脑组织和血凝块应缩短在二甲苯中的留置时间,而肌肉组织应延长在二甲苯中的留置时间。③如组织块进入二甲苯时出现浑浊或组织块经二甲苯适度处理后仍不显透明时,说明该组织脱水不充分,应查找原因。④二甲苯应及时过滤、更换。浸蜡①浸蜡要掌握适宜恒温,温度一般高于石蜡熔点2-3℃即可,一般保持在65℃为宜。若温度偏低时,石蜡开始凝集,则达不到浸蜡的目的,温度过高,浸蜡的组织常出现收缩变硬,同时,组织中的抗原易被破坏,因而影响免疫组化酶标记染色。②浸蜡所用时间可根据组织块的大小适当调整,活检的各种小标本及动物实验标本取的组织块一般较小,上述浸蜡时间应相对缩短,浸蜡总时间以1h为宜。③熔蜡的容积应为组织块总体积的5-10倍以上。④应尽量减少将透明后组织块表面的二甲苯带入熔蜡中。⑤浸蜡用的石蜡也要定期更换,以度,大约1个月左右调换一次。下面从原理方面简要介绍几种常用的组织化学染色技术:1、显示琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的硝基-BT法:(Succinatedehydrogenase)⑴酶的定位及生物学意义:琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶,其存在于所有有氧呼吸的细胞,和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白(FP,Flavoprotein)为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。⑵原理:上述的反应后一步的原理是,硝基-BT(Nitro-bluetetrozolyum,四唑氮蓝)系异环族化合物四唑盐,当它接受氢时,本身被还原为有色沉淀产物(甲)(Formazan)。