二组织化学和细胞化学染色法组织化学和细胞化学,是将物理和化学的技术运用到组织标本,用显微镜和化学分析方法来研究组织和细胞内的化学成分,并观察该化学成分在组织、细胞内的定位、含量及其变化规律。这些化学成分借着化学反应所产生的不溶性着色物质来显示。对于某些化学成分,例如:Fe 糖原、核酸等,可以用直接或间接的化学反应产生着色沉淀而显示其部位和相对含量。对于酶类,显示它的活性,须有该种酶的底物(被该种酶作用的物质),由酶对底物的分解,直接或间接地生成着色物质而被显示。凡是在光学显微镜下观察细胞原位显示的化学物质,称组织化学,若用电镜观察细胞原位化学成分的着色部位,则称电镜细胞化学,透明①二甲苯的容积应为组织块总体积的5-10倍以上。②组织块在二甲苯中透明的时间,应根据组织的种类和组织块的大小及液体的新鲜程度适当进行调整,如脑组织和血凝块应缩短在二甲苯中的留置时间,而肌肉组织应延长在二甲苯中的留置时间。③如组织块进入二甲苯时出现浑浊或组织块经二甲苯适度处理后仍不显透明时,说明该组织脱水不充分,应查找原因。④二甲苯应及时过滤、更换。浸蜡①浸蜡要掌握适宜恒温,温度一般高于石蜡熔点2-3℃即可,一般保持在65℃为宜。若温度偏低时,石蜡开始凝集,则达不到浸蜡的目的,温度过高,浸蜡的组织常出现收缩变硬,同时,组织中的抗原易被破坏,因而影响免疫组化酶标记染色。②浸蜡所用时间可根据组织块的大小适当调整,活检的各种小标本及动物实验标本取的组织块一般较小,上述浸蜡时间应相对缩短,浸蜡总时间以1h为宜。③熔蜡的容积应为组织块总体积的5-10倍以上。④应尽量减少将透明后组织块表面的二甲苯带入熔蜡中。⑤浸蜡用的石蜡也要定期更换,以度,大约1个月左右调换一次。下列的各种切片方法基本上属于制作玻片的各种切片方法。切片前会因应材料特性要作某些处理,切片后,便进入染色及制片的阶段。徒手切片:意即仅用双手及刀片来切片的方法。若材料过小,可置于干燥的通草髓中,再徒手切片。木材切片:木材由于质坚硬,不易进行切片,需要先裁取适当的大小(通常为0.5×0.5×4厘米,适于切片机的大小)以煮沸法去除材料中的气体,再将材料软化(软化剂如甘油、三甘醇),软化后的材料再以切片机进行切片。埋蜡切片:将材料埋于蜡块中,再连同蜡块一同切片,切片完再将材料里的石蜡去除的方法。