石蜡包埋切片的HE染色法分色后用自来水或加数滴氨水碱化,直至细胞核变成蓝色。这一步骤也可称为“蓝化”。入蒸馏水洗去碱性水分。入70%酒精→80%酒精各5分钟。入伊红染液染色30秒至数分钟。以95%酒精对伊红分色,至胞浆,结缔组织等呈桃红色。上行脱水:染色后的切片,因组织内含水而不透明,不能清晰地观察其微细结构。因此,须将组织内的水分经各级酒精→无水酒精逐步置换,后进入不含水份的透明剂内。透明:入二甲苯透明剂,二次(各数分钟)。取出切片:将组织周围多余的二甲苯擦去,滴树胶后加盖玻片封固。结果:细胞核蓝紫色,胞浆、胶原纤维、肌纤维为桃红色,嗜酸性颗粒为鲜红色,弹性纤维呈明亮桃红色。下列的各种切片方法基本上属于制作玻片的各种切片方法。切片前会因应材料特性要作某些处理,切片后,便进入染色及制片的阶段。徒手切片:意即仅用双手及刀片来切片的方法。若材料过小,可置于干燥的通草髓中,再徒手切片。木材切片:木材由于质坚硬,不易进行切片,需要先裁取适当的大小(通常为0.5×0.5×4厘米,适于切片机的大小)以煮沸法去除材料中的气体,再将材料软化(软化剂如甘油、三甘醇),软化后的材料再以切片机进行切片。埋蜡切片:将材料埋于蜡块中,再连同蜡块一同切片,切片完再将材料里的石蜡去除的方法。调整切片厚度调整器,以3-5um为宜,进行切片。切出的蜡片应连续成完整的带状,用毛笔轻轻将蜡片托起,而后用眼科镊夹起,正面向上放入水浴锅的温水中(水温一般低于蜡熔点10-12℃,在45-50℃左右),待切片展平后,即可进行分片和捞片。每次展片完后,必须认真清理水面,不得遗留组织碎片,以防造成污染。将蜡片捞起并附贴于涂有蛋白甘油的载玻片上,捞片时应注意蜡片位置(放在载玻片左或右2/3处中央),要留出贴标签的空间,蜡片与载玻片之间应无气泡。捞起切片后,立即写上编号。烤片:将已放置了蜡片的载玻片呈45o斜置片刻,待载玻片上的水分流下后插入切片架中,放入烤箱内烘烤,一般在60℃烤箱内烤30-60min,也可用烤片器烤片。经烘烤后,蜡熔化,切片牢固的贴于载玻片上。